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動物魚類蛋白質(zhì)的測定方法

作者：祎鴻儀器點擊率：發(fā)布時間：2017-11-20 17:48:00

　　魚粉是一種重要的蛋白質(zhì)原料，其安全性問題不能忽略。安全性主要體現(xiàn)在是否有藥物和有毒物質(zhì)殘留，具體檢測的指標包括新鮮度、藥物殘留、衛(wèi)生指標等。魚粉的新鮮度差，會嚴重降低魚粉的品質(zhì)，甚至喪失飼用價值。筆者著重討論可標識魚粉新鮮度的揮發(fā)性鹽基氮（ＶＢＮ）含量的檢測。

　?。郑拢问侵竸游镄允澄镉捎诿负图毦淖饔?，

　　在腐敗過程中，蛋白質(zhì)分解而產(chǎn)生氨以及含氮胺類物質(zhì)。此類物質(zhì)具有揮發(fā)性，在堿性溶液中蒸出后，用標準酸液滴定從而計算含量。本試驗根據(jù)此原理，在半微量檢測方法的基礎(chǔ)上改良，使檢測更簡易、快捷。

　　１試劑

　　１．１１％氧化鎂混懸液

　　分析純氧化鎂１．０ｇ溶于１００ｍＬ蒸餾水中，振搖成混懸液。

　?。保玻玻ヅ鹚嵛找?/div>

　　分析純硼酸２ｇ溶于１００ｍＬ蒸餾水。

　　１．３０．１ｍｏｌ／Ｌ鹽酸標準液

　　吸取分析純鹽酸８．３ｍＬ，用蒸餾水定容至

　?。保埃埃埃恚蹋脽o水碳酸鈉標定。１．４０．０１ｍｌ／Ｌ鹽酸標準液

　　用０．１ｍｏｌ／Ｌ鹽酸標準溶液稀釋。

　?。保祷旌现甘緞?/div>

　　甲基紅０．１％乙醇溶液，溴甲酚綠０．５％乙醇溶液，兩溶液等體積混合，陰涼處保存３個月以內(nèi)。

　?。矁x器

　?。玻?a href="http://www.0471198.com/article/type/83-1.html">全自動凱氏定氮儀２．２磁力攪拌器２．３離心機２．４消化管

　　２．５滴定管最小分度０．０１ｍＬ３分析步驟３．１樣品處理

　　稱取１０ｇ魚粉（精確至±０．０００１）于２５０ｍＬ錐形瓶中，加１００ｍＬ（Ｖ總）蒸餾水，于磁力攪拌器上攪拌３０ｍｉｎ，４０００ｒ／ｍｉｎ。

　　３．２蒸餾滴定

　　吸取２０．０ｍＬ２％硼酸吸收液于錐形瓶中，加混合指示劑２￣３滴，使ＫＤＮ－２Ｃ型定氮儀的冷凝管末端浸入此溶液。準確吸?。保埃埃恚蹋ǎ址郑┥鲜鰳悠非逡河谙苤校由倭空麴s水沖洗，再加入１０ｍＬ１％的氧化鎂溶液，蒸餾至１５０ｍＬ（約

　　５ｍｉｎ）。吸收液立即用０．０１ｍｏｌ／Ｌ鹽酸標準溶液滴

　　定，溶液由藍綠色變?yōu)榛壹t色為終點，同時做試劑空白。

　?。从嬎?/div>

　　揮發(fā)性鹽基氮（Ｗ）以每１００ｇ樣品含氮ｍｇ數(shù)表示。

　　Ｗ（ｍｇ／１００ｇ）＝Ｃ×（Ｖ１－Ｖ２）×１４ｍ×

　?。ǎ址秩。挚偅粒保埃?/div>

　?。祝瓨悠分袚]發(fā)性鹽基氮的含量，ｍｇ／１００ｇ；Ｖ１－測定試樣所消耗鹽酸標準溶液體積，ｍＬ；Ｖ２－試劑空白消耗鹽酸標準溶液體積，ｍＬ；Ｃ－鹽酸標準溶液的實際濃度，ｍｏｌ／Ｌ；

　　１４－與１．００ｍＬ標準標準滴定溶液［ｃ（ＨＣｌ）＝１．０００ｍｏｌ／Ｌ］相當?shù)牡馁|(zhì)量，ｍｇ；

　　檢測分析

　?。模澹簦澹颍恚椋睿幔簦椋铮睿幔睿洌粒睿幔欤螅椋?/div>

　?。恚瓨悠焚|(zhì)量，ｇ。

　　結(jié)果的表述：取兩次結(jié)果的平均值，保留３位有效數(shù)字。

　　溫度對ＶＢＮ含量的影響

　　磁力攪拌過程也要維持一定的溫度，溫度越高，ＶＢＮ含量越大，檢驗的誤差越大（表２）。

　?。翟试S差

　　相對誤差≤１０％。

　　溫度ＶＢＮ（ｍｇ／１００ｇ）

　?。保埃担保埃福保玻玻保担?/div>

　　２０℃２５℃３０℃３２℃

　?。队绊懸蛩?/div>

　?。叮睍r間

　?。郑拢蔚臋z測反映的是魚粉腐敗過程所產(chǎn)生的

　　氨以及胺類等堿性含氮物質(zhì)，因此，離心后的樣液應馬上檢測。筆者以粗蛋白質(zhì)含量為６５％的進口秘魯魚粉為例，對比時間對ＶＢＮ含量的影響（表１）。

　　時間

　　以上表明，磁力攪拌中控制溫度在２０￣２５℃最佳。

　?。菲渌?/div>

　?。罚濒~粉執(zhí)行質(zhì)量標準（魚粉ＧＢＴ１９１６４－２００３）

　　主要技術(shù)參數(shù)

　　項目粗蛋白質(zhì)／％

　　時間對ＶＢＮ含量的影響

　　ＶＢＮ（ｍｇ／１００ｇ）

　　１７５１５８１３３１１２１０６１０５

　　魚粉ＧＢＴ１９１６４－２００３

　　指標

　　特級品一級品二級品三級品

　?。玻瑁保瑁埃担瑁保埃恚椋睿担恚椋睿常恚椋?/div>

　　≥６５≥６０≥５５≥５０≤１５０

　　揮發(fā)性鹽基氮ＶＢＮ（ｍｇ／１００ｇ）≤１１０≤１３０≤１５０

　?。罚脖緳z測方法可推廣應用至其他的動物性蛋

　　以上表明，試液應在５ｍｉｎ以內(nèi)進行測定。

　　白質(zhì)飼料，例如血漿蛋白粉、血球蛋白粉，等等。

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